🧪 NGHIÊN CỨU ĐẠI HỌC: HIỆU QUẢ KHÁNG KHUẨN CỦA ELAN®C12

Tổng quan

Glycerol monolaurin (GML) là một monoglyceride có tác dụng kháng khuẩn mạnh, chủ yếu chống lại các vi khuẩn Gram dương như Staphylococcus spp., Enterococcus faecalisClostridium perfringens, trong khi ít hiệu quả hơn đối với vi khuẩn Gram âm như E. coliSalmonella spp.

Glycerol monolaurinthành phần hoạt chất chính của Elan®C12, được sử dụng nhằm cải thiện sức khỏe đường ruột bằng cách kiểm soát sự phát triển của vi khuẩn gây bệnh tiềm tàng trong ruột non của động vật đơn vị dạ dày (monogastric).
Trong thí nghiệm in vitro, nồng độ ức chế tối thiểu (MIC) của Elan®C12 được xác định tại Công ty NPChemBio Co., Ltd. (Hàn Quốc).


VẬT LIỆU VÀ PHƯƠNG PHÁP

  • Elan®C12 90% được hòa tan trong ethanol 99,9% trước khi sử dụng.

  • Ba chủng vi khuẩn: Streptococcus pneumoniae, Staphylococcus aureusClostridium perfringens được cấy lên đĩa thạch tryptic soy agar, ủ 24 giờ ở 37°C.

  • Các khuẩn lạc đơn được thu hoạch, chuyển vào môi trường lỏng tryptic soy broth, và tiếp tục ủ 24 giờ ở 37°C.

  • Mức độ phát triển của vi khuẩn được đánh giá bằng cách đo mật độ quang học (OD) tại 600 nm bằng quang phổ kế (spectrophotometer).

  • Huyền phù vi khuẩn được chuẩn hóa ở mức 5×10⁵ CFU/mL.

➡️ Mẫu chứa Elan®C12 được pha loãng nối tiếp hai lần (two-fold dilution).

  • 96 µL môi trường và 4 µL dung dịch mẫu được trộn và cho vào từng giếng của đĩa 96 giếng (microtiter plate).

  • Streptomycin (10 µg/mL) được dùng làm đối chứng dương; 4 µL ethanol (không có mẫu thử) dùng làm đối chứng âm.

  • Các giếng chỉ chứa môi trường (không có vi khuẩn hay mẫu thử) được dùng để hiệu chỉnh giá trị OD nền (blank).

Đĩa 96 giếng được ủ 24 giờ ở 37°C, sau đó các giếng được trộn đều lạiđo OD ở 600 nm.
Giá trị OD được hiệu chỉnh theo mẫu trắng và sử dụng để tính tỷ lệ ức chế sự phát triển vi khuẩn.

👉 Nồng độ ức chế tối thiểu (MIC) được định nghĩa là nồng độ thấp nhất đạt 100% ức chế phát triển vi khuẩn.


Trong mỗi biểu đồ cột,

  • Đối chứng dương (positive control) được thể hiện bằng màu xanh lá cây.

  • Hiệu quả ức chế vi khuẩn được biểu thị theo hướng từ phải sang trái, bắt đầu từ nồng độ Elan®C12 cao nhất ở bên phải, và mỗi cột kế bên trái có nồng độ giảm một nửa (halve).

  • Cột có nồng độ thấp nhất vẫn đạt ức chế hoàn toàngiá trị MIC.


KẾT QUẢ (RESULTS)

Thí nghiệm cho thấy đường cong ức chế rõ ràngnồng độ càng cao, hiệu quả ức chế càng mạnh.

Cụ thể:

  • Clostridium perfringens: ức chế 99% ở 35 µg/mL

  • Streptococcus pneumoniae: ức chế 99% ở 8,75 µg/mL

  • Staphylococcus aureus: ức chế 99% ở 20 µg/mL

Các giá trị MIC này được tính trên sản phẩm Elan®C12 (90% GML).
Không xác định được MIC đối với:

  • Salmonella gallinarum

  • Salmonella typhimurium

  • E. coli
    … đến nồng độ cao nhất được thử nghiệm (70 µg/mL, 70 µg/mL và 1,48 mg/mL).

➡️ Do đó, không có kết quả báo cáo đối với nhóm vi khuẩn Gram âm này.


Ý NGHĨA ỨNG DỤNG (PRACTICAL RELEVANCE)

Dựa trên các giá trị MIC, có thể tính rằng:

Liều Elan®C12 60% ở mức 500 g/tấn thức ăn (≈ 300 µg GML/mL)
(giả định tỷ lệ nước : thức ăn = 2 : 1)
đủ để hạn chế sự phát triển của các vi khuẩn Gram dương gây hại trong ruột non.


KẾT LUẬN (CONCLUSIONS)

Liều dùng Elan®C12 60% ở mức 500 g/tấn thức ăn có hiệu quả trong việc
ức chế sự phát triển của Streptococcus pneumoniae, Staphylococcus aureusClostridium perfringens trong đường ruột.

Không xác định được MIC đối với vi khuẩn Gram âm, cho thấy Elan®C12 đặc biệt hiệu quả với nhóm Gram dương.


VỀ TÁC GIẢ

👨‍🔬 Jan Dirk van der Klis – Chuyên gia tư vấn Dinh dưỡng vật nuôi

  • Tiến sĩ Dinh dưỡng động vật (PhD), Đại học Wageningen (Hà Lan).

  • chuyên gia hàng đầu về dinh dưỡng gia cầm, có nhiều đóng góp nổi bật trong ngành.

  • Với chuyên môn sâu rộng, ông cung cấp giải pháp dinh dưỡng hiệu quả giúp tăng sức khỏe đường ruột và năng suất chăn nuôi.

  • Từ năm 2019, ông hợp tác cùng Olus để phát triển các chiến lược dinh dưỡng tối ưu cho vật nuôi

Nguồn : Antibacterial effects of glycerol monolaurin additive Elan®C12 - Olus